Apoptotic effect of Bulbine Natalensis and Chlorophytum Comosum in myelogenous Leukemia K562 cell line / Efeito apoptótico da natalensia bulbina e do clorofito comoso na linhagem celular mielogênea da leucemia K562

Abstract Bulbine natalensis and Chorophytum comosum are potential medicinal source for the treatment of cancers. Chronic myeloid leukaemia is a hematopoietic stem cells disorder treated by tyrosine kinase inhibitors but often cause recurrence of the leukaemia after cessation of therapy, hence require alternative treatment. This study determines the anti-cancer effect of leaf, root and bulb methanolic and aqueous extracts of B. natalensis and C. comosum in chronic human myelogenous leukaemia (K562) cell line by MTT, Hoechst bis-benzimide nuclear and annexin V stain assays. The root methanolic extract of B. natalensis and C. comosum showed a high cytotoxicity of 8.6% and 16.7% respectively on the K562 cell line at 1,000 μg/ml concentration. Morphological loss of cell membrane integrity causing degradation of the cell and fragmentation were observed in the root methanolic extract of both plants. A high apoptosis (p < 0.0001) was induced in the K562 cells by both leaf and root extracts of the C. comosum compared to the B. natalensis. This study shows both plants possess apoptotic effect against in vitro myelogenous leukaemia which contributes to the overall anti-cancer properties of B. natalensis and C. comosum to justify future therapeutic applications against chronic myelogenous leukaemia blood cancer.

Resumo Bulbine natalensis Baker e Chorophytum comosum (Thunb.) Jacques são potenciais fontes medicinais para o tratamento de cânceres. A Leucemia Mieloide Crônica (LMC) é um distúrbio das células-tronco hematopoiéticas que é tratado com inibidores da tirosina quinase, mas frequentemente, causa recorrência da leucemia após a interrupção da terapia, portanto, requer um tratamento alternativo. Este estudo determinou o efeito anticancerígeno de extratos metanólicos e aquosos de folha, raiz e bulbo de B. natalensis e C. comosum na linhagem celular de leucemia mieloide humana crônica (K562) por ensaios de MTT, Hoechst bis-benzimida nuclear e anexina V. O extrato metanólico da raiz de B. natalensis e C. comosum apresentou alta citotoxidade de 8,6% e 16,7% respectivamente, na linhagem celular K562 com a concentração de 1,000 μg / ml. Perda morfológica da integridade da membrana celular causando degradação dos núcleos, citoplasma e encolhimento celular foi observada no extrato metanólico da raiz de ambas as plantas. Uma alta apoptose (p <0,0001) foi induzida nas células K562 por extratos de folhas e raízes de C. comosum em comparação com B. natalensis. Este estudo mostrou que ambas as plantas possuem efeito apoptótico contra leucemia mieloide in vitro que contribui para as propriedades anticâncer gerais de B. natalensis e C. comosum para justificar futuras aplicações terapêuticas contra câncer de sangue de LMC.

Apoptotic effect of Bulbine Natalensis and Chlorophytum Comosum in myelogenous Leukemia K562 cell line

Abstract Bulbine natalensis and Chorophytum comosum are potential medicinal source for the treatment of cancers. Chronic myeloid leukaemia is a hematopoietic stem cells disorder treated by tyrosine kinase inhibitors but often cause recurrence of the leukaemia after cessation of therapy, hence require alternative treatment. This study determines the anti-cancer effect of leaf, root and bulb methanolic and aqueous extracts of B. natalensis and C. comosum in chronic human myelogenous leukaemia (K562) cell line by MTT, Hoechst bis-benzimide nuclear and annexin V stain assays. The root methanolic extract of B. natalensis and C. comosum showed a high cytotoxicity of 8.6% and 16.7% respectively on the K562 cell line at 1,000 g/ml concentration. Morphological loss of cell membrane integrity causing degradation of the cell and fragmentation were observed in the root methanolic extract of both plants. A high apoptosis (p 0.0001) was induced in the K562 cells by both leaf and root extracts of the C. comosum compared to the B. natalensis. This study shows both plants possess apoptotic effect against in vitro myelogenous leukaemia which contributes to the overall anti-cancer properties of B. natalensis and C. comosum to justify future therapeutic applications against chronic myelogenous leukaemia blood cancer.

Resumo Bulbine natalensis Baker e Chorophytum comosum (Thunb.) Jacques são potenciais fontes medicinais para o tratamento de cânceres. A Leucemia Mieloide Crônica (LMC) é um distúrbio das células-tronco hematopoiéticas que é tratado com inibidores da tirosina quinase, mas frequentemente, causa recorrência da leucemia após a interrupção da terapia, portanto, requer um tratamento alternativo. Este estudo determinou o efeito anticancerígeno de extratos metanólicos e aquosos de folha, raiz e bulbo de B. natalensis e C. comosum na linhagem celular de leucemia mieloide humana crônica (K562) por ensaios de MTT, Hoechst bis-benzimida nuclear e anexina V. O extrato metanólico da raiz de B. natalensis e C. comosum apresentou alta citotoxidade de 8,6% e 16,7% respectivamente, na linhagem celular K562 com a concentração de 1,000 g / ml. Perda morfológica da integridade da membrana celular causando degradação dos núcleos, citoplasma e encolhimento celular foi observada no extrato metanólico da raiz de ambas as plantas. Uma alta apoptose (p 0,0001) foi induzida nas células K562 por extratos de folhas e raízes de C. comosum em comparação com B. natalensis. Este estudo mostrou que ambas as plantas possuem efeito apoptótico contra leucemia mieloide in vitro que contribui para as propriedades anticâncer gerais de B. natalensis e C. comosum para justificar futuras aplicações terapêuticas contra câncer de sangue de LMC.

Biological characterization of implant surfaces - in vitro study / Caracterização biológica de superfície de titânio - estudo in vitro

Objective: Evaluate the biological performance of titanium alloys grade IV under different surface treatments: sandblasting and double etching (Experimental surface 1; Exp1, NEODENT); surface with wettability increase (Experimental surface 2; Exp2, NEODENT) on response of preliminary differentiation and cell maturation. Material and method: Immortalized osteoblast cells were plated on Exp1 and Exp2 titanium discs. The polystyrene plate surface without disc was used as control group (C). Cell viability was assessed by measuring mitochondrial activity (MTT) at 4 and 24 h (n = 5), cell attachment was performed using trypan blue exclusion within 4 hours (n = 5), serum total protein and alkaline phosphatase normalization was performed at 4, 7 and 14 days (n = 5). Data were analyzed using one-way ANOVA and Tukey test. Result: The values of cell viability were: 4h: C - 0.32±0.01A; Exp1 - 0.34±0.08A; Exp2 - 0.29±0.03A. 24h: C - 0.43±0.02A; Exp1 - ; 0.39±0.01A; Exp2 - 0.37±0.03A. The cell adhesion counting was: C -85±10A; Exp1- 35±5B; Exp2& - 20±2B. The amounts of serum total protein were 4d: C - 40±2B; Exp1 - 120±10A; Exp2 -130±20A. 7d: C 38±2B; Exp1 - 75±4A; Exp2 -70±6A. 14 d: C - 100±3A; Exp1 - 130±5A; Exp2 - 137±9A. The values of alkaline phosphatase normalization were: 4d: C - 2.0±0.1C; Exp1 - 5.1±0.8B; Exp2 - 9.8±2.0A<. 7d: C -1.0±0.01C; Exp1 - 5.3±0.5A; Exp2 - 3.0±0.3B. 14 d: C - 4.1±0.3A; Exp1 - 4.4±0.8A; Exp2 - 2.2±0.2B. ...

Objetivo: Avaliar o desempenho biológico de ligas de titânio grau IV submetidos a diferentes tratamentos de superfície - jateamento e duplo ataque ácido (Superfície experimental 1; Exp1, NEODENT) e superfície com aumento na molhabilidade (Superfície experimental 2; Exp2, NEODENT) em resposta preliminar de diferenciação e maturação celular. Material e método: Foram plaqueados osteoblastos imortalizados sobre discos de titânio de Exp1 e Exp2 e como controle o poço da placa de cultura sem disco (C). Empregou-se ensaios de viabilidade celular (MTT) em 4 e 24 horas (n = 5), adesão celular em 4 horas (n = 5), dosagem de proteínas totais e fosfatase alcalina normalizada em 4, 7 e 14 dias (n = 5). Os dados foram analisados por ANOVA em fator único seguido de teste de Tukey. Resultado: Os valores de viabilidade celular foram: 4h: C - 0,32±0,01A; Exp1 - 0,34±0,08A; Exp2 - 0,29±0,03A. 24h: C - 0,43±0,02A; Exp1 - 0,39±0,01A; Exp2 - 0,37±0,03A. A contagem de adesão celular foi: C - 85±10A; Exp1 - 35±5B; Exp2 - 20±2B. Os valores de proteínas totais foram: 4d: C - 40±2B; Exp1 - 120±10A; Exp2 - 130±20A. 7d: C - 38±2B; Exp1 - 75±4A; Exp2 - 70±6A. 14 d: C - 100±3A; Exp1 - 130±5A; Exp2 - 137±9A. Os valores de fosfatase alcalina normalizada foram: 4d: C - 2,0±0,1C; Exp1 - 5,1±0,8B; Exp2 - 9,8±2,0A, 7d: C - 1,0±0,01C; Exp1 - 5,3±0,5A; Exp2 - 3,0±0,3B, 14 d: C - 4,1±0,3A; Exp1 - 4,4±0,8A; Exp2 - 2,2±0,2B. Letras diferentes representam ...

Compostos coordenados híbridos de platina no tratamento do câncer / Platinum hybrid coordinated compounds in cancertreatment

O câncer, ou neoplasia, é uma doença caracterizada pela propagação descontrolada de formas anormais das próprias células corporais e corresponde à segunda doença que mais causa mortes no mundo. A história da platina no tratamento do câncer teve início com a descoberta da sua atividade, em 1965, com a aprovação para uso clínico acontecendo apenas após 10 anos. Atualmente, os fármacos com platina estão entre os mais bem sucedidos agentes anticancerígenos, onde se destacam cisplatina (1), carboplatina (2) e oxaliplatina (3). Seus mecanismos de ação são similares: estes fármacos formam adutos com o DNA, impedindo a sua síntese e reparo, levando à morte celular. Contudo, os efeitos adversos desencadeados pelo tratamento e o desenvolvimento de resistência ao medicamento têm limitado suas aplicações. Uma das principais estratégias para a diminuição de tais efeitos consiste em alterar a estrutura destas moléculas, levando à formação de compostos híbridos, que se caracterizam pela presença de pelo menos dois fragmentos funcionais distintos em uma mesma molécula e podem apresentar maior espectro de atividade antitumoral. Dentre as alterações mais comuns encontram-se a modificação da solubilidade, através da inserção de grupos abandonadores mais ou menos hidrofóbicos e a introdução de ligantes com atividade biológica própria. Dessa forma, esta revisão visa verificar os avanços mais recentes na síntese de compostos híbridos de platina, bem como as melhorias na atividade anticâncer dos novos compostos platinados...

Cancer, or neoplasm, is a disease characterized by the uncontrolled propagation of abnormal cells of the body and is the second leading death-causing disease. The history of platinum in cancer treatment goes back to the discovery of its activity in 1965 and its approval for clinical use just 10 years later. Some of the most successful anticancer agents are Pt-based chemotherapeutics, among which cisplatin (1), carboplatin (2), and oxaliplatin (3) stand out. They have similar mechanisms of action: they form adducts with DNA, preventing its synthesis and repair and leading to cell death. However, adverse effects triggered by treatment and the development of resistance to these drugs have limited their application. One of the most important strategies to reduce such effects is to carry out structural modifications of these molecules, leading to hybrid compounds that are characterized by the presence of at least two distinct functional fragments on the same molecule and can exhibit a broader antitumor activity spectrum. Among the most typical modifications are changes to the solubility pattern, created by the insertion of leaving groups with high or low hydrophobicity, and the introduction of biologically active ligands as non-leaving groups. The purpose of these strategies is to obtain compounds capable of reducing systemic toxicity and/or overcoming acquired resistance factors to cisplatin. Therefore, the aim of this review is to discuss the most recent advances in the synthesis of hybrid platinum compounds, as well as improvements in the anticancer activity of Pt-compounds...

Avaliação das potenciais atividades tripanocida e antileishmania do extrato de folhas de Piper arboreum (Piperaceae) e de suas frações / Evaluation of the potential trypanocidal and antileishmanial activities in Piper arboreum (Piperaceae) leaf extract and its fractions

A leishmaniose e a tripanossomíase americana fazem parte de um grupo de doenças tropicais endêmicas, especialmente entre as populações pobres. São consideradas doenças negligenciadas por não despertarem interesse da indústria farmacêutica. Atualmente, a quimioterapia é o único tratamento específico disponível para estas doenças, onde os medicamentos utilizados são nifurtimox e benzonidazol. Este trabalho teve como objetivo avaliar a atividade antiparasitária e citotóxica do extrato bruto etanólico e frações de folhas de Piper arboreum, frente a linhagens de Leishmania brasiliensis e de Trypanosoma cruzi. Após a preparação do extrato etanólico bruto e as suas respectivas frações, testes in vitro foram realizados para avaliar atividade antiparasitária frente a T. cruzi, utilizado o clone epimastigota CL-B5 e contra L.brasiliensis foram utilizadas formas promastigotas. O ensaio de citotoxicidade foi realizado com linhagens de fibroblastos NCTC929. Os resultados indicaram que as amostras apresentaram toxidade elevada, com exceção da fração de acetato de etila. Já os resultados da atividade antiparasitária indicaram uma maior atividade da fração hexânica observando a morte de 62% e 51% de células epimastigotas e de 100% e 92% de células promastigotas, respectivamente. Através dos resultados conclui-se que a P. arboreum pode ser considerada uma fonte alternativa de produtos naturais com atividade contra T. cruzi e L. brasiliensis...

Leishmaniasis and South American trypanosomiasis (Chagas disease) are part of a group of related human diseases endemic in tropical regions, especially among the poor. They are referred to as neglected diseases, because of a lack of interest on the part of the pharmaceutical industry. Today, chemotherapy is the only specific treatment against these diseases, the most frequently used drugs being nifurtimox and benznidazole. The aim of this study was to assess the antiparasitic and cytotoxic activity of the crude ethanolic leaf extract of Piper arboreum and its fractions against strains of Leishmania brasiliensis and Trypanosoma cruzi. After preparing the crude ethanolic extract and fractions, in vitro tests were performed to assay antiparasitic activity against T. cruzi, using the epimastigote clone CL-B5, while against L. brasiliensis, promastigote forms were used. The cytotoxicity assay was performed with a fibroblast cell line, NCTC 929. The results indicate that the samples possessed high toxicity, except for the ethyl acetate fraction. The results for antiparasitic activity showed highest activity in the hexane fraction, which was lethal to 62% and 51% of the epimastigotes and 100% and 92% of the promastigotes, at 500 and 100µg/mL, respectively. From these results, it is concluded that P. arboreum can be considered an alternative source of natural products with activity against T. cruzi and L.brasiliensis...

Avaliação da neutralização dos efeitos citotóxicos do ácido lipoteicóico em canais radiculares / Neutralizing evaluation of lipoteichoic acid cytotoxic effect

O ácido lipoteicóico (LTA) é um importante fator de virulência das bactérias Gram-positivas. Assim, o objetivo desse estudo foi determinar a eficácia do preparo biomecânico realizado com diferentes agentes irrigantes e medicações intracanal na neutralização do LTA em canais radiculares. Foram seccionados e padronizados 108 raízes de dentes humanos uni-radiculares. Após esterilização, os canais foram inoculados com solução de LTA. Após esta contaminação, os mesmos foram submetidos a preparo biomecânico através de sistema rotatório (BioRace)e divididos em 9 grupos, variando-se as soluções irrigantes (hipoclorito desódio 1%, clorexidina gel 2% e extrato glicólico de própolis 12%) e as medicações intracanal (hidróxido de cálcio + soro; hidróxido de cálcio +clorexidina gel 2%; clorexidina gel 2%). Foram realizadas 3 coletas dos canais radiculares: após o preparo biomecânico, após EDTA e após medicação intracanal por 14 dias. Realizou-se ativação de macrófagos com as amostras, os quais tiveram seu sobrenadante coletado após 24 horas. Este sobrenadante foi utilizado para verificação da produção de citocinas (TNF-α, IL-6, IP-10, MIP-1α e IL-1β) e G-CSF através de teste imunoenzimático (ELISA). De acordo com os resultados de S1 e S2,houve diferença estatística entre os vários grupos, sendo que o hipoclorito de sódio gerou as menores médias de TNF-α, IL-6, IP-10, MIP-1α e GCSFa própolis as menores médias de IL-1β. Em relação aos resultados de S3, todos os grupos apresentaram baixos índices de citocinas.Concluiu-se que o hipoclorito de sódio 1% associado a instrumentação rotatória é o agente irrigante mais eficiente na neutralização dos efeitos citotóxicos do LTA, seguido pelo extrato glicólico de própolis 12%. Além disso, todos os protocolos de tratamento analisados foram efetivos na neutralização dos efeitos citotóxicos do LTA

The lipoteichoic acid (LTA) is a Gram-positive bacteria’s virulence factor,which should be neutralized on endodontic treatment. The objective of thisstudy is determining the effectiveness of biomechanical preparation performed with different auxiliary solutions and different intracanal medications in the neutralization of LTA in root canals. For this, 108 human teeth were sectioned and standardizing. After sterilization, the canals were inoculated with known amount of LTA solution. After contamination of specimens, they were subjected to biomechanical preparation through rotary system (BioRace) and divided into 9 groups,according the irrigating solutions (1% sodium hypochlorite, 2%chlorhexidine gel and 12% propolis glycolic extract) and intracanal medications (calcium hydroxide + physiologic solution; calcium hydroxide+ 2% chlorhexidine gel; chlorhexidine gel 2 %). There were performed 3sample collections from the root canals: after biomechanical preparation,after EDTA (3 min) and after intracanal medication (14 days). Held macrophage activation with the samples, which had its supernatant collected after 24 hours. This supernatant was used to investigate the production (TNF-α, IL-6, IP-10, MIP-1α and IL-1β) and G-CSF by enzy melinked immunosorbent assay (ELISA). According to the results, there was statistic difference between the groups. Sodium hypochlorite showed thebest results on TNF-α, IL-6, IP-10, MIP-1α e G-CSF and propolis on IL-1β.In S3, all groups showed low indices. The sodium hypochlorite is the best irrigant in neutralizing cytotoxicity effects of LTA, and all protocols are efficient on neutralizing LTA cytotoxic effect

Avaliação da neutralização dos efeitos citotóxicos do ácido lipoteicóico em canais radiculares / Neutralizing evaluation of lipoteichoic acid cytotoxic effect

O ácido lipoteicóico (LTA) é um importante fator de virulência das bactérias Gram-positivas. Assim, o objetivo desse estudo foi determinar a eficácia do preparo biomecânico realizado com diferentes agentes irrigantes e medicações intracanal na neutralização do LTA em canais radiculares. Foram seccionados e padronizados 108 raízes de dentes humanos uni-radiculares. Após esterilização, os canais foram inoculados com solução de LTA. Após esta contaminação, os mesmos foram submetidos a preparo biomecânico através de sistema rotatório (BioRace)e divididos em 9 grupos, variando-se as soluções irrigantes (hipoclorito desódio 1%, clorexidina gel 2% e extrato glicólico de própolis 12%) e as medicações intracanal (hidróxido de cálcio + soro; hidróxido de cálcio +clorexidina gel 2%; clorexidina gel 2%). Foram realizadas 3 coletas dos canais radiculares: após o preparo biomecânico, após EDTA e após medicação intracanal por 14 dias. Realizou-se ativação de macrófagos com as amostras, os quais tiveram seu sobrenadante coletado após 24 horas. Este sobrenadante foi utilizado para verificação da produção de citocinas (TNF-α, IL-6, IP-10, MIP-1α e IL-1β) e G-CSF através de teste imunoenzimático (ELISA). De acordo com os resultados de S1 e S2,houve diferença estatística entre os vários grupos, sendo que o hipoclorito de sódio gerou as menores médias de TNF-α, IL-6, IP-10, MIP-1α e GCSFa própolis as menores médias de IL-1β. Em relação aos resultados de S3, todos os grupos apresentaram baixos índices de citocinas.Concluiu-se que o hipoclorito de sódio 1% associado a instrumentação rotatória é o agente irrigante mais eficiente na neutralização dos efeitos citotóxicos do LTA, seguido pelo extrato glicólico de própolis 12%. Além disso, todos os protocolos de tratamento analisados foram efetivos na neutralização dos efeitos citotóxicos do LTA.

The lipoteichoic acid (LTA) is a Gram-positive bacteria’s virulence factor,which should be neutralized on endodontic treatment. The objective of thisstudy is determining the effectiveness of biomechanical preparation performed with different auxiliary solutions and different intracanal medications in the neutralization of LTA in root canals. For this, 108 human teeth were sectioned and standardizing. After sterilization, the canals were inoculated with known amount of LTA solution. After contamination of specimens, they were subjected to biomechanical preparation through rotary system (BioRace) and divided into 9 groups,according the irrigating solutions (1% sodium hypochlorite, 2%chlorhexidine gel and 12% propolis glycolic extract) and intracanal medications (calcium hydroxide + physiologic solution; calcium hydroxide+ 2% chlorhexidine gel; chlorhexidine gel 2 %). There were performed 3sample collections from the root canals: after biomechanical preparation,after EDTA (3 min) and after intracanal medication (14 days). Held macrophage activation with the samples, which had its supernatant collected after 24 hours. This supernatant was used to investigate the production (TNF-α, IL-6, IP-10, MIP-1α and IL-1β) and G-CSF by enzy melinked immunosorbent assay (ELISA). According to the results, there was statistic difference between the groups. Sodium hypochlorite showed thebest results on TNF-α, IL-6, IP-10, MIP-1α e G-CSF and propolis on IL-1β.In S3, all groups showed low indices. The sodium hypochlorite is the best irrigant in neutralizing cytotoxicity effects of LTA, and all protocols are efficient on neutralizing LTA cytotoxic effect.

Atividade Antimicrobiana e Citotoxicidade do extrato bruto obtido de Morus Alba L. (Moraceae) / Antimicrobial Activity and Cytotoxicity of crude extract obtained of Morus Alba L. (Moraceae)

O presente trabalho avaliou a atividade antimicrobiana in vitro do extrato hidroetanólico e frações hexânica, clorofórmica, acetato de etila e butanólica das folhas de Morus alba L. A concentração inibitória mínima (CIM) foi determinada frente à Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans, Aspergillus fumigatus e Prothoteca zophii. As frações que apresentaram melhores respostas para a atividade antimicrobiana foram acetato de etila e clorofórmica com CIM de 256 ?g/mL. Não foi possível detectar atividade antimicrobiana para Aspergillus fumigatus em nenhuma das concentrações testadas. A citotoxidade do extrato hidroetanólico foi avaliada através de culturas de células de ovário de hamster chinês (CHO) e células do tecido conectivo de camundongo (NCTC) clone 929, determinando o índice de citotoxidade (IC50). O IC50 foi de 0,34 mg/mL para as células CHO e 3,24 mg/mL para as células NCTC 929. De modo geral, as frações acetato de etila e clorofórmica das folhas de M. alba L. apresentaram moderada atividade antimicrobiana e o extrato bruto demonstrou ação citotóxica in vitro frente as células CHO e NCTC 929.

This study evaluated the in vitro antimicrobial activity of hydroethanolic extract and hexane, chloroform, ethyl acetate and butanol fractions from Morus alba L. leaves. The minimum inhibitory concentration (MIC) was determined using Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans, Aspergillus fumigatus and Prothoteca zophii. The fractions that better responded the antimicrobial activity were ethyl acetate and chloroform with CIM of 256 ?g/mL. It was unable to detect antimicrobial activity for Aspergillus fumigatus in the tested concentrations. The cytotoxicity of the hydroethanolic extract was evaluated by cell cultures of chinese hamster ovary (CHO) and connective tissue of mouse clone 929 (NCTC), determining the level of cytotoxicity (IC50). The IC50 obtained was 0.34 mg/mL for CHO and 3.24 mg/ml for NCTC 929 cells. In general, ethyl acetate and chloroform fractions from M. alba L. leaves showed moderate antimicrobial activity and its extract presented in vitro cytotoxicity against CHO and NCTC 929 cells.

Citotoxicity of orthodontic mini-implants / Citotoxidade de mini-implantes ortodônticos

OBJECTIVE: Based in the premise that Ti-6Al-4V orthodontic mini-implants can release metal ions into the body fluids, this research is aimed assess the cytotoxic effect of orthodontic mini-implant on L929 fibroblast cells. MATERIAL AND METHODS: Eighteen orthodontic mini-implants made of Ti-6Al-4V alloy were divided into 6 groups: 1 (golden colour, SIN), 2 (silver colour, SIN), 3 (Neodent™), 4 (INP™), 5 (Mondeal™), and 6 (Titanium Fix™). The mini-implants were immersed into Eagle’s minimum essential medium for 24 hours, where supernatant removal and contact with L929 fibroblasts were performed. Cytotoxicity was evaluated in four different periods of time: 24, 48, 72, and 168 hours. After being in contact with the mini-implants immersed, the cells were incubated for further 24 hours and then 100 ml of 0.01% neutral-red staining solution were added. After this period of time, they were fixed and a spectrophotometer was used for counting the viable cells. RESULTS: After the 24 hours period, statistical differences were found by comparing groups 1 and 2 to groups 3,4,5, and C+ (p < 0.05). After the 48 hours period, groups 1 and 2 were shown to be statistically different in relation to groups 3, 4, and C+. After the 72 hours period, statistical differences were found only in group 1 compared to groups 4, 5, 6, CC, and C+ (p < 0.05). After 7 days, no statistical differences were found between the mini-implants. CONCLUSION: Although mini-implants are made of the same alloy, there are differences in their cytotoxicity because of the different concentrations of chemical elements used for manufacturing them.

OBJETIVO: Baseando-se na premissa de que mini-implantes ortodônticos podem liberar íons metálicos nos fluidos corporais, pesquisou-se o efeito citotóxico de mini-implantes ortodônticos em fibroblastos L929. MATERIAL E MÉTODO: Dezoito mini-implantes ortodônticos confeccionados em liga Ti-6Al-4V foram divididos em seis grupos: 1 (dourados, SIN), 2 (prateados SIN), 3 (Neodent), 4 (INP), 5 (Mondeal) e 6 (Titanium Fix). Os mini-implantes foram imersos em meio mínimo essencial Eagle por 24 horas, onde efetuou-se remoção do supernadante e contato com fibroblastos L929. A citotoxicidade foi avaliada em 4 diferentes tempos: 24, 48, 72 e 168 horas. Após contato com os mini-implantes imersos, as células foram incubadas por mais 24 horas; então, 100 ml de solução corante neutra-vermelha foram adicionados. Após, foram fixadas e um espectrofotômetro foi usado para contar as células viáveis. RESULTADOS: Após o período de 23 horas, compararam-se os grupos 1 e 2 aos grupos 3, 4, 5 e C+. Após 72 horas, diferenças estatísticas foram encontradas somente no grupo 1, comparado aos grupos 4, 5, 6, CC e C+ (p < 0,05). Após 7 dias, não foram encontradas diferenças estatisticamente significantes entre os diversos mini-implantes.

Antioxidant capacity and biological activity of essential oil and methanol extract of Hyptis crenata Pohl ex Benth / Capacidade antioxidante e atividade biológica do óleo essencial e extrato metanólico de Hyptis crenata Pohl ex Benth

O óleo essencial das folhas e ramos finos frescos e secos de Hyptis crenata forneceu os seguintes rendimentos, 1,4 por cento e 0,9 por cento. Os constituintes voláteis principais foram ±-pineno (22,0 por cento; 19,5 por cento), 1,8-cineol (17,6 por cento; 23,2 por cento), ²-pineno (17,0 por cento: 13,8 por cento), cânfora (4,7 por cento; 11,6 por cento), limoneno (5,4 por cento; 4,4 por cento) e ³-terpineno (3,5 por cento; 2,4 por cento), totalizando mais de 70 por cento nos óleos. A atividade de seqüestro do radical DPPH para o extrato metanólico (CE50, 16,7 + 0,4 µg/mL) foi comparável ao do BHT (19,8 ± 0,5 µg/mL) mostrando uma significante atividade antioxidante. Os óleos apresentaram baixa atividade. O teor de fenólicos totais (TP, 373,0 + 15,9 mg GAE/g) e equivalente trolox (TEAC, 226,8 + 0,5 mg TE/g) confirmaram a atividade antioxidante do extrato metanólico, que pode ser atribuída à presença de compostos fenólicos polares. No teste com larvas de camarão as concentrações letais para o óleo e extrato metanólico foram 6,7 + 0,2 µg/mL e 13,0 + 3,7 µg/mL, respectivamente, fornecendo importante evidência de suas atividade biológicas.

The essential oils of fresh and dried leaves and fine stems of Hyptis crenata furnished the following yields: 1.4 percent and 0.9 percent. The main volatile constituents were ±-pinene (22.0 percent; 19.5 percent), 1,8-cineole (17.6 percent; 23.2 percent), ²-pinene (17.0 percent; 13.8 percent), camphor (4.7 percent; 11.6 percent), limonene (5.4 percent; 4.4 percent) and ³-terpinene (3.5 percent; 2.4 percent), totalizing more than 70 percent in the oils. The DPPH radical scavenging activity (EC50, 16.7 + 0.4 µg/mL) of the methanol extract was comparable to BHT (19.8 ± 0.5 µg/mL) showing a significant antioxidant activity. The oils showed low activities. The amount of total phenolics (TP, 373.0 + 15.9 mg GAE/g) and trolox equivalent (TEAC, 226.8 + 0.5 mg TE/g) confirmed the antioxidant activity of the methanol extract that can be attributed to the presence of polar phenolic compounds. In the brine shrimp bioassay the lethal concentrations (LC50) for the oil and methanol extract were 6.7 + 0.2 µg/mL and 13.0 + 3.7 µg/mL, respectively, providing important evidence of their biological activities.